摘要:采用聚合酶链反应(PCR)技术对分枝杆菌16S～23S rDNA间隔区序列进行扩增，其产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)，并通过计算机聚类分析，在基因水平上评价其对分枝杆菌分类与鉴定的意义。退火温度45℃时，PCR扩增的敏感性为500fg/μL，而50℃时的敏感性为5pg/μL。已通过对22种分枝杆菌和9种非分枝杆菌的特异性实验，结果表明：扩增条带多集中在300～600bp之间，多数受试快速生长分枝杆菌和非分枝杆菌扩增条带多且分子量较大，缓慢生长分枝杆菌扩增条带相对较少，分子量较小。PAGE和计算机聚类分析结果显示，分枝杆菌种间条带特异性的相似性系数均小于70%，且绝大多数菌种间小于50%。可将被试菌株鉴定到种的水平。PAGE和聚类分析是分枝杆菌分类鉴定的一种快速、有效的方法。
