嗜热菌Aquifex pyrophilus中mbh2基因簇的鉴定和部分基因的克隆及测序

摘要:

基于嗜热菌Aquifexaeolicus的mbhS2基因 ,设计合成特异性引物 ,以Aquifexpyrophilus的染色体DNA为模板 ,应用PCR技术扩增出目的片段。序列测定结果显示 ,其推导出的氨基酸序列与A .aeolicus的相应序列具有 85 %的同源性。以此PCR片段为探针 ,从A .pyrophilus的NcoⅠ部分基因组文库 (4～ 6kb)中筛选出含 5kb大小插入片段的阳性克隆 ,进而对其进行了亚克隆及测序。结果表明 ,该插入子包含A .pyrophilusmbh2基因簇的小亚基基因mbhS2、orf1基因和部分orf2基因。所推导出的氨基酸序列与A .aeolicus的MbhS2和Orf96 3相比较的同源性分别为 81%和 60 %。

关键词:Aquifex pyrophilus; mbh2基因簇; 基因组文库; 亚克隆

Abstract:

Key words:Aquifex pyrophilus; mbh2基因簇; 基因组文库; 亚克隆