摘要:用化学诱变剂N甲基N′硝基N亚硝基胍进行随机诱变，获得了穿梭启动子探测质粒pPGV5的温度抗性突变型pPGV5(tr65)，序列分析发现质粒上卡那霉素核苷转移酶基因kan的+238位碱基发生了G→T的单点突变。以来自嗜热脂肪芽孢杆菌FDTP3菌株的耐热邻苯二酚2,3双加氧酶基因pheB作为报道基因，构建了转录融合质粒pPGVPB452，用高压电穿孔法将其转化嗜热脂肪芽孢杆菌，通过报道蛋白活性的分析，证明了嗜热脂肪芽孢杆菌T521菌株的6磷酸葡萄糖异构酶同工酶基因pgiB上游含启动子样序列的425bp片段在嗜热脂肪芽孢杆菌中不具有启动子功能。
