平颏海蛇PLA2在大肠杆菌中的融合表达

摘要:

将编码平颏海蛇磷脂酶A2的基因(PLA29)分别克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载体pThioHisC和pTRX的HP\|trxA和trxA基因的3′末端，构建符合读码框的融合表达载体pThioHisC\|PLA2和pTRX\|PLA2。25℃下经IPTG诱导，PLA2融合蛋白在两种原核系统中均能获得较高表达，但PLA2在pTRX系统下的表达量和蛋白溶解性优于pThioHisC系统。将两种系统下的表达产物进行金属螯合亲和层析纯化，Trx\|PLA2融合蛋白的纯度可达85%以上，而HPTrxPLA2不表现出对介质的亲和性，难以得到纯化。由此，将pTRX\|PLA2载体系统确立为进一步大量表达和纯化的载体系统。

关键词:平颏海蛇磷脂酶A2， 融合表达， 亲和层析

Abstract:

Key words:平颏海蛇磷脂酶A2， 融合表达， 亲和层析