软腐欧氏杆菌的Ⅲ型分泌系统对harpin蛋白的识别与分泌

摘要:

本文研究软腐欧氏杆菌分泌致病蛋白的Ⅲ型分泌系统的组分是否能识别梨火疫欧氏杆菌存在于mRNA上的分泌识别信号。用PCR的方法，将带有上游75bp可以在其mRNA的5′端形成一个典型的作为Ⅲ型分泌识别信号的茎环结构的梨火疫欧氏杆菌的诱导植物过敏反应的harpin的基因hrpN，从带有hrp基因簇的质粒pCPP430上克隆到pGEM\|T载体上，获得重组质粒pWGF1，经化学法转化到hrpN基因的转座突变体DH5α(pCPP430hrpN-)中，同时将pWGF1电击转化到胡萝卜软腐欧氏杆菌Se9R中，转化子的无细胞抽提物(CFEP)经Western\|blot检测到harpin蛋白已被表达；带有双重质粒的DH5α(pCPP430hrpN-/pWGF1)在番茄植物上可以引起过敏反应，Se9R(pWGF1)在大白菜上的致病力明显低于Se9R,初步表明一种植物病菌的harpin蛋白可被另外一种病菌的Ⅲ型分泌系统所识别、分泌并保持生物活性。

关键词:Ⅲ型分泌系统; hrp基因簇; Harpin

Abstract:

Key words:Ⅲ型分泌系统; hrp基因簇; Harpin