伪狂犬病病毒上海株(PRV-SH)gE-/gI/GFP+缺失株的构建

摘要:

在构建了含伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上，采用酶切的方法构建了载体pgEI。然后用限制性内切酶BamHI和BstpI缺失掉gE基因5'端363bp，同时把绿色荧光蛋白（GFP）基因表达盒插入到缺失部分，并在下游引入一个多克隆位点，构建了缺失转移载体pgEIGFP。用DOTAP转染试剂盒将pgEIGFP转染了感染PRVSH的BHK21细胞，待出现80%病变后收获病毒，并以蚀斑法得到纯化的缺失了gE/gI重组病毒株。小鼠试验证实了缺失株的毒力有所下降。

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