摘要:以钝齿棒杆菌（Corynebacterium crenatum）突变株CD945的基因组为模板，运用PCR方法，扩增出丙酮酸羧化酶的基因片段。核苷酸序列分析结果表明，该片段全长3657bp，以GTG为起始密码子，编码一个ORF。该ORF的核酸序列与Corynebacterium glutamicum,Mycobacterium smegmatis以及Saccharomyces cerevisiae的丙酮酸羧化酶结构基因相比，相似性分别为98.22%、62.41%和49.61%。由ORF推导出的氨基酸序列与上述属种的丙酮酸羧化酶相比，同源性分别是99.30%、64.65%和44.04%。经证实对于酶的催化活性至关重要的一些保守区域，如ATP和生物素的结合位点等，在该氨基酸序列中都存在。将该基因片段转化钝齿棒杆菌（C. crenatum） CD945，利用CTAB处理细胞和苹果酸脱氢酶偶联测定相结合的方法，进行酶活力的分析，结果表明，重组子与供体菌相比，丙酮酸羧化酶的活力提高5倍。
