白念珠菌H310D突变型14α-去甲基化酶的克隆、表达及活性的初步研究

摘要:

利用错配内部引物，采用重组PCR方法获得H310D突变型白念珠菌14α去甲基化酶（CYP51），构建H310D突变型CYP51蛋白的表达载体pYCYP51M，转化进入酵母菌INVSC-1中，半乳糖诱导蛋白的表达，微量液基稀释法测定表达野生型及突变型CYP51蛋白的宿主酵母菌对氟康唑的MIC。表达的CYP51蛋白占微粒体蛋白酶系的15%；表达突变蛋白的酵母菌MIC值是表达野生蛋白的酵母菌MIC值的2倍。CYP51蛋白H310D的突变导致表达突变蛋白的酵母菌对氟康唑MIC的升高，证明H310残基对CYP51蛋白与氟康唑的结合有一定作用，为研究新型抗真菌前导化合物寻找新的靶点。

Abstract: