甾醇酰基转移酶基因高表达对酵母菌麦角甾醇合成的影响

摘要:

通过PCR扩增克隆到含酵母菌甾醇酰基转移酶基因ARE2编码序列和上游调控序列的DNA片段ARE21及仅含编码序列的DNA片段ARE22。分别以ARE2启动子，乙醇脱氢酶基因ADH1启动子和铜抗性基因CUP1启动子及ADH1终止子为调控元件构建了酵母菌表达质粒pHX2，pHXA2和pHXC2。表达质粒分别转化酿酒酵母单倍体菌株YS58和以前通过细胞杂交构建的麦角甾醇高产菌株YEH56。通过营养缺陷互补和铜抗性筛选到转化子，质粒上的ARE2基因在YS58和YEH56中都实现了活性表达，使细胞内甾醇酯化水平升高，并导致细胞麦角甾醇含量的提高。对转化菌株的培养条件进行了初步研究，在优化条件下，重组转化菌株YEH56(pHX2)、YEH56(pHXA2)和YEH56(pHXC2)的麦角甾醇含量分别是受体菌YEH56 的13、13和14倍。

Abstract: