摘要:利用平板快速筛选法，从鱼腹中筛选到一株产生硫酸软骨素酶的细菌YH311，通过生物特性和生化反应试验考察，初步鉴定为温和气单胞菌（Aeromonas sobria）。培养至36h时，该菌株产酶达到高峰期，培养液的酶活力达09U/mL。利用超声波破碎菌体细胞，分别测定培养液和菌体细胞的酶活力，发现培养液的酶活力要远远大于菌体细胞的酶活力，显示该酶为分泌型表达，属于胞外酶。发酵液经离心后，上清液用硫酸铵分级沉淀，再分别经过CMCellulose、QAEsephadex A50和Sephadex G150层析柱进行逐级分纯，并跟踪酶活，最后获得硫酸软骨素酶。SDSPAGE检测为单一条带，其分子量约为80kD。
