摘要:利用重叠PCR的方法，通过两次PCR扩增，分别获得cry2Aa10操纵元的orf1、orf1+orf2与cry2Ab5基因的融合片段。融合片段经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切与pHT315连接，分别构建了基因融合片段的原核表达载体pFU(orf1+2Ab)和pFU(orf1+orf2+2Ab)，电转化Bt无晶体突变株4Q7后，扫描电镜下可观察到典型的方形晶体，通过SDSPAGE可检测到60kD大小的蛋白表达带。结果表明，cry2Ab5可在cry2Aa10的启动子帮助下有效转录和表达，并在orf2产物帮助下形成蛋白晶体。
