以减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的构建及其对小鼠的免疫原性

摘要:

根据GenBank中已发表的H5亚型禽流感病毒HA基因序列，设计一对引物，通过RTPCR扩增鹅源H5亚型高致病力禽流感病毒HA基因，测序确认后，将其克隆入真核表达载体pVAX1和asdpVAX1得到重组表达载体pVAX1HA和asdpVAX1HA。将重组质粒转染P815细胞，经间接免疫荧光试验证实，HA基因在细胞内得到了瞬时表达。进一步将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550得到两种运送DNA疫苗的重组沙门氏菌X4550（pVAX1HA）和X4550（asdpVAX1HA），以1×109CFU/只的剂量两次口服免疫BALB/c小鼠，免疫小鼠不仅可以检测到HA特异性的血清抗体应答，而且还能抵抗稳定表达H5亚型禽流感病毒HA基因的P815肥大细胞瘤的攻击，说明该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能够成功释放所携带的质粒，并且能够刺激机体产生保护性免疫应答。

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