烟草花叶病毒运动蛋白cDNA的克隆及融合蛋白的表达

摘要:

从烟草花叶病毒(TMV)中提取总RNA，通过反转录PCR (RTPCR) 扩增得到其运动蛋白(MP)的基因，将扩增产物克隆到pMD18T载体上。DNA序列分析表明，所得到的运动蛋白的基因全长为807bp (GenBank接受号AY300161), 与已发表TMV序列（GenBank登陆号为NC-001367）和同属的番茄花叶病毒（ToMV, GenBank登陆号为NC-002692相比核苷酸的同源性分别为98.0％和80.9％，氨基酸的同源性分别为99.1％和80.0％。 将目的片段亚克隆到表达载体pET30a上，并在大肠杆菌JM109中诱导表达，诱导9h 后，融合蛋白表达量最大。诱导后的工程菌超声后经SDSPAGE检测，融合蛋白以可溶形式存在。

Abstract: