禽腺病毒江苏株（JS）复制非必需片段的确定

摘要:

利用PCR方法从一株Ⅰ群禽腺病毒的分离物(FAVIJS)中扩增出其基因组的两个末端L片段和r片段、ITR片段，并分别克隆进pGEMT easy载体，然后将L片段、r片段和ITR片段同时克隆进pHC粘粒载体中，获得质粒pHCFAVIrITRL，再在该克隆片段中插入增强型绿色荧光蛋白（eGFP）基因，获得转移质粒载体pFAVIeGFP。将pFAVIeGFP转染已被该野生型Ⅰ群禽腺病毒分离物感染了的鸡胚肾细胞进行同源重组，通过无限稀释法筛选重组病毒，结果获得了表达增强型绿色荧光蛋白的重组Ⅰ群禽腺病毒rFAVIeGFP，证明位于基因组右末端r片段和ITR片段之间的位点为病毒复制非必需区，为禽腺病毒的重组基因工程疫苗的研究奠定了基础。

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