斜纹夜蛾核多角体病毒p49基因在大肠杆菌中的表达及其在昆虫细胞中的表达时相分析

摘要:

利用PCR方法从斜纹夜蛾核多角体病毒（SpltMNPV）基因组中扩增获得了细胞凋亡抑制基因〖STBX〗p49〖STBZ〗的完整ORF并将其克隆于pMD18T载体，其序列分析结果与文献报道一致。将基因重组于硫氧还蛋白融合表达载体pThioHis C，在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了稳定表达，表达的P49融合蛋白占菌体总蛋白30%左右，主要以包涵体形式存在。分离纯化重组表达的SpltMNPV P49蛋白作为抗原，免疫家兔制备得到效价高于1∶10000的抗重组P49蛋白多克隆抗体。应用制备的抗体对受SpltMNPV感染的Sl细胞中P49蛋白的表达时相进行分析，结果显示P49蛋白在细胞感染后3h内便可检测到，并在整个感染期间维持着低水平表达。

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