摘要:应用Mu转座重组技术研究铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)蹭行运动(Twitching motility)的相关基因。通过转座突变、表型筛选,得到8个 Twitching motility缺陷或减弱的突变子。经过基因克隆、核苷酸测序研究,鉴定转座子插入到基因组中的位置。结果表明,在其中4个突变子中,转座子分别插入到与IV型菌毛生物合成和功能相关的3个已知基因中(其中有两个突变子转座子插入到同一基因的不同位置),它们是 pilV,pilQ,algR。另外4个突变子中,有3个是转座子分别插入到基因pilL基因的前端,中部和后端,均引起Twitching motility 功能缺失。另一个突变子中,转座子插入到基因PA1821中,引起Twitching motility功能减弱。 PilL和PA1821的编码产物均属于3类蛋白质,它们的功能是根据其保守的氨基酸基序或基因序列与已知功能基因的相似性推测得出的。但缺乏详细的试验证据。研究结果为pilL控制Twiching motility提供了有力的证据。并证实基因PA1821与Twitching motility 有关。将Mu转座重组技术应用到假单胞菌的研究中,国内外均未见报道。由于该技术具有随机单点插入的优点,克服了传统转座子能在染色体上迁移的缺点。保证了表型的改变与转座子插入位点的基因突变的一一对应关系。为进一步研究铜绿假单胞菌Twitching motility 的分子机制奠定基础。