摘要:苹果酸通透酶具有协助苹果酸乳酸发酵（MLF）的重要功能。以酒类酒球菌（Oenococcus oeni）优良菌系OenococcusLeeSD2a的总DNA为模板，用PCR方法克隆到苹果酸通透酶基因mleP，构建了重组质粒pBMmleP。序列分析表明克隆到的基因序列与已报道的序列同源性为99％。为使目的基因在酿酒酵母中表达，以大肠杆菌酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体，以PGK1强启动子和ADH1终止子为调控元件，构建了重组表达质粒YEpmleP，并转化酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）YS58。酵母转化子用含有亮氨酸、组氨酸和色氨酸的YNB平板筛选鉴定。获得的转化子在添加了L苹果酸(5g/L)的培养基中培养4d；取培养液上清用HPLC检测，结果显示重组转化子YSP的培养液中L苹果酸剩余含量均低于空载体转化子YS352，因此所得酵母重组转化子对苹果酸的转运能力有所提高。
