摘要:克隆表达钩端螺旋体表层膜蛋白新基因Lslp并分析表达产物的免疫原性。根据前期研究得到的致病钩体新基因Lslp（GenBank AF325807）的序列设计引物，在6株致病钩体中扩增Lslp基因并测序。以BamHⅠ酶切Lslp和pGEX 1λT，构建重组质粒并用酶切和PCR鉴定，进一步在大肠杆菌中诱导表达，并进行免疫印迹分析；纯化表达产物免疫家兔，ELISA检测血清抗体滴度。结果显示Lslp在6株致病钩体中均能扩增出相应片段，且序列同源性达到996%；构建高效原核表达重组质粒pGSTLslP，经IPTG诱导在大肠杆菌中可表达出66kD GST融合蛋白，并能与全钩抗血清发生免疫印迹反应；将上述融合蛋白免疫新西兰大白兔产生1：5120 高滴度的IgG抗体。研究结果提示致病钩体膜蛋白新基因Lslp可在大肠杆菌进行高效表达，表达产物能被全钩抗血清识别，为研究钩体的致病机制和筛选保护性抗原提供了基础。
