摘要:野生型hbFGF蛋白可溶性与稳定性较低一直是困扰研发人员的难题。分析其氨基酸序列发现含有4个游离巯基，其中第78、96、101位半胱氨酸游离巯基可能直接影响其可溶性、稳定性及活性。 对天然hbFGF进行定点突变，一组将Cys78、Cys96同时突变，另一组将Cys78、Cys96与Cys101进行联合突变，均改为丝氨酸密码子，然后克隆入原核表达载体pET3c，进行表达， 结果发现两种突变蛋白的可溶性大幅度增加，稳定性明显上升，其中三点突变的效果更为显著，但蛋白质的活性明显下降。可以认为78、96与101位半胱氨酸的游离巯基同时参与了天然hbFGF多聚体的形成，是导致野生型hbFGF可溶性与稳定性较低的主要原因，Cys101还与维持hbFGF的活性直接有关。
