摘要:利用PCR方法从烟草曲茎病毒（TbCSV）Y35分离物的病株中获得复制蛋白（Rep）基因，将其克隆到原核表达载体pGEX4T1上获得重组质粒pGEXY35Rep。重组质粒导入大肠杆菌BL21（DE3）pLys S中，IPTG诱导表达后发现部分Rep融合蛋白以可溶性形式表达。利用GSTSepharose 4B亲和层析柱纯化了Rep的融合蛋白，免疫家兔获得Rep蛋白的抗体。对TbCSV侵染烟草中Rep蛋白的亚细胞分布研究发现，Rep蛋白主要分布于含有细胞核的组份中。利用免疫胶体金技术对感病烟草中Rep蛋白进行了定位，发现Rep蛋白存在于细胞核内。
