毛壳霉内切菊粉酶的纯化与性质

摘要:

毛壳霉（Chaetomium sp.）C34发酵液经硫酸铵分级沉淀、DEAE纤维素11离子交换层析、QSepharose Fast Flow离子交换层析、Sephacryl S200 凝胶过滤、Phenol SepharoseTM HP疏水层析，得到电泳纯的内切菊粉酶组分，纯化倍数为30.8倍，活力回收率为7.7%。用SDSPAGE测得该酶亚基的分子量为66kD。菊粉酶的最适pH为6.0，最适温度为50～55℃。菊粉酶在50℃以下，pH50～8.0时较稳定。Cu2+完全抑制酶的活性，Mn2+、Zn2+、Fe2+、EDTA以及NBS（Nbromosuccinimide, N溴代丁二酰亚胺）对该酶有很强的抑制作用。该酶对菊粉有较强底物专一性，产物主要为低聚果糖，也可作用于蔗糖，I/S值为20。以菊粉为底物时，Km为0.199mmol/L，Vmax为115μmol/(mg·min)。

关键词:毛壳霉，内切菊粉酶，纯化，性质

Abstract:

Key words:毛壳霉，内切菊粉酶，纯化，性质