摘要:以ILTV基因组为模板，利用PCR特异扩增出gB基因，定向克隆到中间质粒载体pY_α，构建了中间质粒pY_α_gB。然后以中间质粒pY_α_gB为模板，扩增出含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的hsp_α_gB片段，回收补平后与穿梭表达载体pRR3平端连接，从而构建大肠杆菌_分枝杆菌穿梭表达质粒pR_α_gB。再将其电转化至耻垢分枝杆菌M.smegmatis mc2 155，ELISA检测表明重组菌株M.smegmatis mc2155（pR_α_gB）的表达产物具有很好的反应原性。Western blot检测说明gB基因在分枝杆菌中获得了表达并具有良好的免疫原性。鸡胚中和试验结果表明该重组菌株可以中和1个剂量EID50的ILTV强毒，能够保护SPF鸡胚抵抗强毒攻击。
