摘要:选择一株鹅源H5N1亚型禽流感病毒（AIV），缺失其HA基因裂解序列的4个碱性氨基酸、使HA裂解模式由高致病性的PQRERRRKKR↓GL突变为低致病性的PQRESR↓GL，将修饰的HA基因克隆入转录/表达载体pHW2000、构建质粒pHW524_HA，将该毒株和H9N2亚型毒株的NA全基因分别克隆入pHW2000，构建质粒pHW506_NA和pHW206_NA。将pHW524_HA与pHW506_NA或pHW206_NA组合、均用A/WSN/33（H1N1）提供6个内部基因，两个组合的8个质粒分别共转染COS_1细胞，产生了H5N1和H5N2两个亚型的基因重排病毒。通过在鸡胚中的连续传代和适应，2个重组病毒血凝价上升到1∶29、表面基因稳定、对6周龄SPF鸡不表现致病性，H5N2重组病毒对鸡胚的毒力低于H5N1病毒。这种尝试证明反向遗传操作技术是研究AIV致病性和构建疫苗候选株的有用工具。
