摘要:将兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因插入杆状病毒转移载体pBLUEBACHIS2_B的6*HIS表达标签下游,与线性化野生型杆状病毒基因组DNA共转染Sf9昆虫细胞,经蚀斑纯化后获克隆化重组杆状病毒pBLUEBACHIS2B_VP60。以重组杆状病毒感染Sf9细胞,经SDS_PAGE和Western blot检测显示高效表达一分子量为69kD的重组蛋白,并且该蛋白可被兔抗R HDV高免血清识别。血凝试验表明,该重组蛋白可以凝集人“O”型红细胞,血凝价达216,同时,该血凝性可被抗RHDV的高免血清所抑制。经电镜观察,重组病毒表达的融合有6*HIS表达标签的衣壳蛋白仍可在昆虫细胞内自聚成不包裹核酸的、与天然RHDV病毒粒子在物理形态上相似的病毒样颗粒(VLPs),并且该VLPs与兔抗RHDV高免血清作用后于电镜下可见凝集成团的现象,表明其与天然RHDV病毒粒子在抗原性上也极为相似。