摘要:以携带质粒pAM120(Tcr/Tn916)的大肠杆菌CG120株为供体菌，采用滤膜接合法与受体菌嗜水气单胞菌J_1株(cfzr) 进行接合转移，在含Tc和cfz选择平板上进行筛选。共获接合转移菌落3800个，其接合频率为3×10-5(按供体细胞计算)。任取38个接合子，提取基因组DNA，以嗜水气单胞菌特异性16S rDNA引物进行 PCR扩增，所有接合子均阳性。为证明Tn916确实插入基因组，以四环素基因（tet）引物进行PCR扩增，结果所有抗性接合子均扩增出一条特异条带。与亲本J_1株相比，所有接合子的主要毒力因子如蛋白酶、溶血素、DNA酶和淀粉酶等均不表达，对小鼠失去致病力，其LD50大于109CFU。接合子连传10次后，四环素抗性消失，但毒力未恢复，说明通过转座子Tn916的插入可获得稳定的无毒嗜水气单胞菌突变株。Tn916引起嗜水气单胞菌毒力性状改变的机制有待研究，推测可能与该菌染色体上存在Tn916的热点或毒力岛有关。
