摘要:以获得的抗A型肉毒毒素人源单链抗体ScFv B17为模板，PCR扩增抗体ScFv基因的重链可变区(VH)和轻链可变区(Vκ)，以重链恒定区1(CH1)5′端12个氨基酸的序列作为连接肽，构建成三结构域抗体分子：VH_连接肽_Vκ（VH/Vκ）。重组VH/Vκ抗体分子在大肠杆菌中得到高效表达，其表达量占菌体总蛋白质的34％以上。表达的蛋白质在菌内形成包含体，采用镍柱金属鏊合层析法对该包含体进行纯化，得到了纯度高达95％的VH/Vκ。ELISA等实验结果显示，重组设计并制备的三结构域抗体蛋白VH/Vκ不但可以特异识别毒素抗原，具有与原母本单链抗体ScFv相同的抗原特异性，而且具有了更高的相对亲和力和稳定性。
