利用8质粒系统拯救A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）株禽流感病毒

摘要:

应用反向遗传技术将含有1998年中国大陆分离株H9N2亚型禽流感病毒（Avian influenza virus，AIV）的8个基因片段的质粒共转染COS_1细胞，产生了与野生病毒生物学特性相同的H9N2亚型AIV。将A/Chicken/Shanghai/F/98（CK/SH/F/98）株H9N2亚型AIV的8个基因组cDNA分别克隆到polⅠ_polⅡ转录/表达载体pHW2000中,构建成8个转录/表达载体重组质粒。将这8个质粒共转染COS_1细胞, 24h后收获细胞及上清接种SPF鸡胚，48h后收取鸡胚尿囊液继续进行鸡胚传代, 产生能致死鸡胚的病毒。经血凝、血凝抑制试验、序列分析和电镜观察，证实产生了CK/SH/F/98(H9N2)株AIV。

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