摘要:为实现重组大肠杆菌以葡萄糖为唯一碳源合成均聚的P(4HB)，PCR扩增大肠杆菌编码谷氨酸：琥珀酰半缩醛转氨基酶基因（gabT），谷氨酸脱羧酶基因（gadA）以及富养罗尔斯通氏菌（Ralstonia eutropha）H16的４_羟基丁酸脱氢酶基因（gadB），并组装到携带富养罗尔斯通氏菌（Ralstonia eutropha）H16的PHA聚合酶基因（phaC）和克氏梭菌（Clostridium kluyveri）中编码４_羟基丁酸：CoA转移酶基因（orfZ）的重组质粒pKESS53上，形成一个大的操纵元。携带重组质粒的大肠杆菌获得从三羧酸循环的中间物——α_酮戊二酸到P(4HB)的代谢途径。结果表明，重组大肠杆菌可以以葡萄糖为唯一碳源合成均聚的P(4HB)，当向以葡萄糖为唯一碳源的无机培养基添加蛋白胨、酵母提取物、酪蛋白水解物时，P(4HB)的含量可以高达菌体干重的30%。
