摘要:细胞色素P450（CYP）是一种单加氧酶，在热带假丝酵母（Candida tropicalis）ω_氧化过程中发挥关键作用。通过对来源不同的P450基因进行同源性分析，首先克隆到热带假丝酵母1230中P450基因的部分序列，再利用基因组步行法克隆其未知序列，结果分别获得了两个P450同工酶基因CYPA14和CYPA16的完整序列。经PCR方法证实，二者在染色体上的位置相邻，其读码框分别编码522和540个氨基酸残基的肽链。经NCBI BLAST搜索比较后发现，二者与热带假丝酵母ATCC 20336中的P450成员CYP52A14和CYP52A16分别编码的序列几乎完全一致，与热带假丝酵母ATCC 750中的P450成员CYP52A2和CYP52A1也具有较高的相似性。同时，对经诱变后的几株二元酸生产菌株的CYPA14与CYPA16也进行了克隆和序列比较，发现部分序列中的个别氨基酸残基发生了突变。 CYPA14和CYPA16均在酿酒酵母中获得了有效表达，其中CYPA16的P450表达含量高于CYPA14，后者有部分表达产物发生了变性。
