摘要:根据GenBank中发布的烟曲霉菌壳聚糖酶（Aspergillus fumigatus chitosanase,EC3.2.1.132）基因序列人工合成8条DNA长链及4条引物链。DNA链的设计上在不改变壳聚糖酶氨基酸组成的前提下选择大肠杆菌使用频率高的密码子。PCR拼接法扩增壳聚糖酶基因并克隆入pGEM_T easy载体进行序列分析，进一步亚克隆入表达载体pGEX_3X。重组质粒pGEX_Csn转化E.coli DH5α，IPTG诱导表达，亲和层析及Factor Xa酶解纯化重组Csn。所得重组壳聚糖酶具有降解壳聚糖的生物活性，其活性受温度及pH值的影响。
