表达人内啡肽的腺病毒/腺相关杂合病毒的构建及体外表达分析

摘要:

应用分子生物学方法将人β_内啡肽融合基因序列克隆入腺病毒穿梭质粒pDC312_AAVEE，后者与骨架质粒共转染HEK293细胞，包装得到含转基因腺病毒/腺相关杂合病毒Ad/AAV_EE。用PCR方法对杂合病毒进行鉴定，TCID50法测定病毒滴度。杂合病毒感染体外培养细胞观察转基因表达，ELISA法测定培养液中表达产物浓度。PCR法证实转基因正确插入了杂合病毒基因组内，且没有野生型病毒污染，病毒滴度为1.29×10 10PFU/mL。结果表明转基因从第1天到第14天的表达水平呈上升趋势，第14天达到3141pg/mL。

关键词:β_内啡肽，腺病毒，腺相关病毒，杂合病毒，构建，表达

Abstract:

Key words:β_内啡肽，腺病毒，腺相关病毒，杂合病毒，构建，表达