摘要:根据中性海藻糖酶NTL基因的同源序列设计引物，PCR扩增出杀蝗专一菌株——金龟子绿僵菌CQMa102 NTL基因片段，利用5′_RACE和3′_RACE扩增出NTL cDNA的5′和3′端序列，经拼接得到CQMa102 NTL基因 cDNA全长。根据其全长cDNA序列，设计引物PCR扩增出CQMa102 NTL的完整基因。为了解该基因的上游调控信息，采用Panhandle Polymerase Chain Reaction Amplification方法扩增其上游序列。序列分析表明， CQMa102 NTL全长DNA 3484bp, cDNA 全长2385bp，编码737个氨基酸的蛋白，推测蛋白分子量为831kD；含有3个内含子，包含一个依赖于cAMP的磷酸化作用位点（RRGS）和一个钙附着位点(DTDGNMQITIED)；上游序列含有一个压力反应元件（CCCCT）；与金龟子绿僵菌广谱性菌株ME1 NTL的核苷酸序列和氨基酸序列分别具有93％和99％同源性，由此确定该序列为金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因序列。Southern杂交表明，NTL基因在CQMa102基因组中为单拷贝。Northern杂交表明，NTL基因转录出约25kb的mRNA单带，在液体培养条件下，对数生长前期表达水平最高，对数生长后期降到最低，进入稳定生长期后表达水平又有所提高。金龟子绿僵菌CQMa102 中性海藻糖酶基因 DNA全长和cDNA全长登录GenBank，登录号分别为：AY557613，AY557612。
