摘要:为从基因水平上改造腈水合酶，进行了诺卡氏菌腈水合酶基因的外源表达研究。在重组大肠杆菌表达系统内，腈水合酶的α亚基几乎不能正常表达，在重组E. coli BL21(DE3) (pET32aNHBAX)中，腈水合酶活性仅为0.04U/mg。构建重组毕赤酵母表达质粒pPIC3.5kNHBAX，采用电穿孔转化法将其转入宿主菌P. pastoris GS115中，经过菌株培养和腈水合酶的诱导表达，筛选获得了优选菌株P. pastoris NH4。对P. pastoris NH4的细胞培养和腈水合酶的诱导表达条件进行优化，结果表明，重组腈水合酶在毕赤酵母中的表达水平可以达到0.52U/mg，但不能稳定积累。
