摘要:GatewayD○R技术构建cDNA文库,利用λ噬菌体的位点特异性重组,避免使用限制性内酶切割cDNA,能够解决常规方法构建cDNA文库的技术缺陷。首次应用GatewayD○R技术构建交链孢菌cDNA文库,经检测cDNA入门文库的滴度达到1×10.7cfu/mL,文库总容量为9×10.7cfu,平均插入片段为1510bp。通过LR重组把入门文库转换为表达文库,表达文库的滴度为1.58×10.6cfu/mL,文库总容量为6.32×10.6cfu,平均插入片段大小为1680bp。表达文库的构建为进一步克隆植物激活蛋白基因打下了基础。