重组酵母鸡γ干扰素的抗病毒活性测定及临床初步应用

摘要:

为了获得具有天然抗病毒活性的重组酵母鸡γ干扰素,以Con A(刀豆素A) 诱导培养4～10h 的鸡全血中提取的淋巴细胞总RNA为模板，通过RTPCR的方法扩增出鸡γ干扰素成熟蛋白基因。通过EcoRⅠ和XbaⅠ两个酶切位点把鸡γ干扰素成熟蛋白基因插入到酵母表达载体pPICZaA上，得到了重组酵母鸡γ干扰素表达载体pPICZaACHIFNγ，经Bstx Ⅰ线性化后的重组载体被转入酵母菌株X33中，通过PCR的方法来筛选重组酵母菌,在甲醇诱导表达后，SDSPAGE结果显示有两株重组菌在诱导72h后其表达上清中有大小为16kDa的目的条带。干扰素生物活性测定经典实验(微量病变抑制实验)和临床初步应用结果皆说明重组酵母鸡γ干扰素具有较强的抗病毒的生物活性和较好的临床使用前景。

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