嗜盐古菌启动子DNA片段的功能检测

摘要:

将来源于嗜盐古菌染色体DNA的启动子片段RM07或RM13插入到启动子探针载体pYLZ_2的报告基因lacZ之前，通过β_半乳糖苷酶酶活性的检测，进一步确证RM07和RM13片段在大肠杆菌（Escherichia coli）中的启动功能。同时用微量热技术检测了大肠杆菌DH5α及其重组菌株在LB培养基中37℃生长过程的热输出功率。T2(pYLZ_2)、TE07(pYL726)、TE07_2(pYL702)、TE131(pYL131)和TE132(pYL132)菌株的生长速率分别比大肠杆菌DH5α降低了6.5%、11%、41.1%、47.5%和42.7%。当启动子启动了基因表达时，菌株的生长速率显著降低，热力学参数与酶活性检测结果有较好的一致性。微量热结果表明基因的表达比质粒DNA的复制过程需要消耗更多的能量，对细菌的生理代谢有较大改变。微量热技术为检测基因的表达和转录调控提供了新的方法和思路。

关键词:启动子;微量热技术;β_半乳糖苷酶基因;嗜盐古菌

Abstract:

Key words:启动子;微量热技术;β_半乳糖苷酶基因;嗜盐古菌