摘要:6_磷酸果糖激酶（PFK）是糖酵解途径一个关键酶。基于腾冲嗜热厌氧菌基因组中的注释，基因TTE1816可能是PFK的一种，但是，它是否确有生物活性还必须有实验数据的支持。腾冲嗜热厌氧菌在最适温度培养后，提取细菌全蛋白，并采用双向电泳将可溶性蛋白质分离，然后运用质谱鉴定若干染色斑点。实验表明，TTE1816在高温条件下能够表达蛋白质。将TTE1816基因体外克隆至细菌表达载体，并在BL_21大肠杆菌中表达为可溶性蛋白。酶动力学实验表明，重组蛋白TTE1816具有PFK的催化活性，最适反应温度在60℃。它还能够催化葡萄糖、果糖、甘露糖和6_磷酸葡萄糖的磷酸化反应。另外，在高底物浓度和酶浓度的条件下，TTE1816还表现果糖二磷酸酶的特性。结果证明，TTE1816是腾冲嗜热厌氧菌中PFK家族的一个新成员。
