重组虎源H5N1流感病毒HA基因犬2型腺病毒的构建与实验免疫研究

摘要:

H5N1流感病毒可以对虎和猫产生致死性感染，为研制可用于预防猫科动物流感的新型疫苗，构建了重组虎源H5N1流感病毒HA基因的犬2型腺病毒。将A/Tiger/Harbin/01/2003（H5N1）的HA基因克隆入pVAX1载体中，然后将含有HA基因的表达盒（CMV＋HA＋PolyA）克隆入pVAXΔE3的SSPⅠ酶切缺失处，获得含有HA表达盒的穿梭载体pΔEHA。用SalⅠ+NruⅠ分别对pΔEHA和pPoly2CAV2进行双酶切，将含有HA表达盒的SalⅠ+NruⅠ片段克隆入pPoly2CAV2，获得了在E3区缺失处插入HA表达盒的重组质粒pCAV2/HA。释放CAV2/HA重组基因组转染MDCK细胞，获得了重组活病毒CAV2/HA，经Western blot分析表明重组表达产物可被流感病毒HA单克隆抗体3A13所识别。使用该重组病毒免疫猫可以产生效价为1∶8～1∶16的抗H5亚型流感病毒血凝抑制抗体。

关键词:HPAIV;血凝素基因;犬2型腺病毒

Abstract:

Key words:HPAIV;血凝素基因;犬2型腺病毒