摘要:根据已知α-淀粉酶编码基因保守区核苷酸序列，通过PCR和反向PCR技术克隆出Bacillus licheniformis CICIM B0204 α淀粉酶编码基因amyL全长序列及其上下游序列。B. licheniformis CICIM B0204 amyL 由1539bp组成，其上游180bp为启动子序列，下游160bp为终止子序列；成熟肽由512个氨基酸残基组成，氨基端的29个氨基酸残基为α淀粉酶的信号肽。通过基因及其氨基酸序列比对发现，amyL及其编码产物与芽孢杆菌来源的α淀粉酶具有高度相似性。将amyL的结构基因在PT7介导下于大肠杆菌中诱导表达，获得具有α淀粉酶活性的表达产物。将amyL 的启动子序列和信号肽序列与B. licheniformis CICIM B2004的β_甘露聚糖酶结构基因进行读框内重组，在大肠杆菌中获得了β_甘露聚糖酶的分泌表达，重组大肠杆菌表达295U/mL的β_甘露聚糖酶酶活。
