利用温控载体构建碱性果胶酯裂解酶工程菌

摘要:

从筛选出的Bacillus subtilis WSHB0402菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL，将其插入载体pET22b(+)多克隆位点，得到带有前导序列PelB重组质粒pET22b(+)PL。以pET22b(+)PL为模板扩增出带前导序列的碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL，将其插入温控载体pHsh，重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达。其表达量与以T7为启动子的重组菌BL21DE3［(pET22b(+)PL］相比，表达量相近。SDSPAGE分析显示表达产物的分子量均为43kDa，同核酸序列测定所推导的值相符。研究表明利用pHsh构建的JM109(pHsh PL)诱导表达好，诱导方式简单廉价，这对该酶的大规模发酵具有重要意义。

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