摘要:利用大肠杆菌质粒pSP72和枯草杆菌质粒pUB18共整合得到双功能克隆载体pSB。在pSB多克隆位点依次引入枯草杆菌果聚糖蔗糖酶基因启动子信号肽序列sacB p.s.、地衣芽孢杆菌淀粉酶基因终止子序列αamy T和短小芽孢杆菌增强子基因degQ，最终构建了双功能枯草杆菌诱导型高效表达分泌载体pSBPTQ。将Vasostatin Ⅰ基因作为靶基因检测sacB p.s.、αamy T和degQ在pSBPTQ进行外源基因表达时的功能，结果表明，在蔗糖诱导下，sacB启动子有效启动了Vasostatin I基因的表达和分泌，αamy T提高了Vasostatin Ⅰ基因的转录效率，而degQ明显增强了Vasostatin Ⅰ基因的表达水平。Vasostatin Ⅰ基因在蔗糖诱导下成功表达并分泌到枯草杆菌细胞外，蛋白质分泌效率达到90%左右。质粒稳定性试验结果表明，经过40个世代之后，质粒pSBPTQ在枯草杆菌DB1342中仍旧保持在83%以上。
