葡萄糖苷转运蛋白Lmo0738介导单增李斯特菌毒力的作用研究
作者:
  • 沈云勤

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    浙江农林大学动物科技学院·动物医学院 浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室 动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心 浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地 中澳动物健康大数据分析联合实验室, 浙江 杭州 311300
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  • 黄丽英

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  • 宋厚辉

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  • 徐加利

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基金项目:

国家重点研发计划(2023YFD1801800);国家自然科学基金(32172849,32302961);浙江省自然科学基金(LY23C180002);宁波市自然科学基金(2022J200)


The glucoside transporter Lmo0738 contributes to virulence of Listeria monocytogenes
Author:
  • SHEN Yunqin

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    Key Laboratory of Applied Technology on Green-Eco-Healthy Animal Husbandry of Zhejiang Province, Zhejiang Provincial Engineering Research Center for Animal Health Diagnostics & Advanced Technology, Zhejiang International Science and Technology Cooperation Base for Veterinary Medicine and Health Management, China-Australia Joint Laboratory for Animal Health Big Data Analytics, College of Animal Science and Technology & College of Veterinary Medicine, Zhejiang A&F University, Hangzhou 311300, Zhejiang, China
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  • WANG Jianfeng

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    Technical Center of Ningbo Customs, Ningbo Academy of Quarantine & Inspection Science and Technology, Ningbo 315100, Zhejiang, China
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  • YING Yu

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  • WENG Yanlan

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  • HAO Yun

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  • HUANG Liying

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  • HAN Yue

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  • SUN Jing

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  • ZHAO Xiuling

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  • SONG Houhui

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  • XU Jiali

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  • CHENG Changyong

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    摘要:

    【目的】 以单增李斯特菌葡萄糖苷转运蛋白Lmo0738为研究对象,研究其介导细菌毒力发挥的生物学作用。【方法】 通过细菌同源重组技术构建lmo0738基因缺失株和回补株,研究它们在生长、溶血、细胞黏附与侵袭以及胞间迁移等方面与野生株的差异。同时,采用荧光定量PCR和Western blotting方法检测Δlmo0738毒力相关基因的转录水平和毒力相关蛋白的表达情况。【结果】 缺失lmo0738后,李斯特菌体外生长能力、溶血能力、黏附和侵袭能力以及胞间迁移能力均显著减弱,溶血素O (listeriolysin O, LLO)蛋白毒力表达水平和关键毒力基因转录水平均显著降低。【结论】 本研究证实缺失lmo0738能够降低单增李斯特菌毒力,为完善包括单增李斯特菌在内的重要食源性病原菌磷酸转移酶系统(phosphotransferase system, PTS)糖分解代谢及感染机制奠定了关键基础。

    Abstract:

    [Objective] To investigate the biological role played by the glucoside transporter Lmo0738 in the virulence of Listeria monocytogenes. [Methods] The lmo0738-deleted mutant (Δlmo0738) and complementation mutant (CΔlmo0738) were constructed by homologous recombination. The growth, hemolytic activity, cellular adhesion and invasion, and intracellular migration of the wild type strain and the mutants were assessed by the growth curves, sheep red blood cell hemolysis assay, infection of human epithelial cells (Caco-2), and infection of mouse fibroblastic cells (L929), respectively. Additionally, the mRNA and protein levels of the virulence factor listeriolysin O (LLO) were determined by real-time quantitative reverse transcription PCR (RT-qPCR) and Western blotting, respectively. [Results] The L. monocytogenes strain with the deletion of lmo0738 demonstrated weakened growth and diminished hemolytic activity. Notably, Δlmo0738 exhibited significantly reduced cell adhesion, invasion, and intracellular migration compared with the wild type strain. In addition, the mRNA and protein levels of LLO were significantly down-regulated in Δlmo0738. [Conclusion] This study provides the evidence that the absence of lmo0738 attenuates the virulence of L. monocytogenes, laying a crucial foundation to illustrate the mechanism of the phosphotransferase system (PTS) in regulating the sugar catabolism and the infection mechanism of major food-borne pathogens including L. monocytogenes.

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

沈云勤,王建峰,应煜,翁艳岚,郝云,黄丽英,韩月,孙静,赵秀玲,宋厚辉,徐加利,程昌勇. 葡萄糖苷转运蛋白Lmo0738介导单增李斯特菌毒力的作用研究[J]. 微生物学报, 2024, 64(8): 2671-2683

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  • 收稿日期:2024-01-05
  • 最后修改日期:2024-04-28
  • 在线发布日期: 2024-08-06
  • 出版日期: 2024-08-04
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