烟叶中依赖于RNA的RNA聚合酶的部分提纯及其合成产物的性质

摘要:

从烟叶无细胞匀浆液的20，000xg沉淀中用含30mM EDTA无Mg2+的悬浮液溶解出依赖于RNA的RNA聚合酶，再用聚乙二醇一葡聚糖双相分离法除去内源RNA，从而获得无内源模板的依赖于RNA的RNA聚合酶。此酶合成RNA绝对依赖于外加的RNA模板，需要四种核糖核苷三磷酸、酶活性可被焦磷酸盐抑制而不被磷酸盐抑制。酶活性不受放线菌素D(AMD)和利福平的抑制。以TMV RNA为模板，该酶催化的合成产物为分子量相当于168的双链RNA和分子量相当于tRNA的单链RNA，90％以上的RNA产物是互补于模板的负链。从感染TMV的烟叶提取的酶(IE)和健康烟叶提取的酶(HE)在性质上无明显差别。对此酶在病毒RNA复制中的作用也进行了初步探讨。

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