固氮螺菌氢代谢与固氮作用的关系III．转座子Tn5诱变的 Azospirillum brasilense 吸氢活性缺陷株的筛选

摘要:

以携带有自杀性质粒pR64：：Tn5的大肠杆菌(E．Coil RL29)为供体菌株，与受体菌巴西固氮螺菌W251-10(Azospirillura brasilense W251-10)进行杂交，在选择性平板上测得卡那霉素抗性菌落与受体菌菌落之比为5．0x 10-7。受体菌W251-10的卡那霉素抗性自发突变频率小于1.14×10-9。经气相色谱仪分析测得一株丧失吸氢酶(Hydrogen Uptake Hydrogenase)活性的突变株(编号为 Azospin llum brasilense WG15)，同时发现其固氮酶(Nitrogenase)话性也已丧失。 DNA分子点杂交结果表明，所获得的突变株WGl5的总DNA中存在有’n5的序列，而w251—10呈阴性结果，从而证实了WGl5吸氢活性的丧失是由于Tn5在DNA中的插入引起的，同时也揭示了巴西固氯螺菌的吸氢酶基因(缸p)和固氮基因(nr，) 在遗传学上有着连锁的关系。

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