摘要:根据杆状病毒A组代表种苜蓿Y纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica Nuclear Po-lyhedrosis Virus,简称AcNPV)的分子生物学资料，我们采用分子剪裁和拼接手段，对AcNPV多角体蛋白基因加以修饰，并用人工合成定位探针，获得大约在该基因的ATG转译起始密码子一9处加有合成BamHl连接序列的转移载体质粒pAc—MV。 再与从乙肝病毒adw亚型的表面抗原基因HBng亚克隆株pYPss一1分出带有Ban·Hl粘性末端的HBsAg基因，构建表达载体质粒pAc—MV—HBsAgo经与野生型AcNPV DNA对Spodoptem 7rugJPerda细胞共转染，借助同源交换，获得插有HBsAg基因的多角体缺陷的重组病毒。根据HBsAg诊断血球凝集试验和HBs^g诊断酶标免疫测定，表明重组病毒使HBsAg基因在昆虫细胞中得到了表达，免疫电镜显示表达产物呈球状颗粒，大小约为22nm。表达产物粗制品按1μg／鼠对bal b／c鼠免疫，并于三周后强化免疫能产生抗体。由HBsAg纯样品酶标免疫法标定的标准曲线估计每升培养物的表达产物约{一8mg，细胞量为1一2×106个/ml.用重组病毒感染玉米螟4龄幼虫，也获得HBsAg基因的表达，展示了简易生产HB sag诊断试剂和疫苗的可喜前景。
