摘要:大肠杆菌的抗铜质粒中含有两个抗铜启动子,PpcoA和PpcoE,它们均含有copperbox。为了证实copper box在抗铜作用中的重要性以及研究抗铜启动子的特性,以质粒pUCD615为报告载体进行了这两个启动子不同长度片段的亚克隆。限制性酶切和DNA序列分析的结果表明,这些片段的亚克隆都是成功的;此外报告基因lux-荧光酶活性测定的结果表明,两个不含有copper box的Ppco short-lux亚克隆均不表达荧光酶活性,而其他启动子片段的亚克隆则都具有较高的酶活性,说明这两个亚克隆不具有启动子功能,初步证明在抗铜启动子中copper box是不可少的。
