黑曲霉糖化酶基因表达调控的研究──Ⅱ.A.niger T21和3.795glaA基因5'调控区功能的体内分析

摘要:

对糖化酶高产菌株A.nigerT21和原始菌株Aniger3．795的glaA5＇上游区的序列分析证明，两者在1．5kb的区域内有9个部位的碱基不同。为考察这些碱基差异是否是引起T21glaA基因转录水平提高的原因，构建了以T21和3．795glaA基因转录调控区及A．Nidulans trpC基因终止子为表达元件的E．Colihph基因表达载体（pXH2和pGH1），用pXH2和pGH1分别转化A.nigerT21，对两种转化子的HmB抗性水平测定和Southern杂交分析显示，在转化子XH2C和GH1C中，pXH2和pGH1以相同拷贝数（2拷贝串联）整合到染色体DNA的相同位置上，XH2C的HmB抗性水平（3000μg／ml）为GH1C（1500μg／ml）的2倍。这一结果表明，诱变引起的调控区序列改变使T21glaA基因转录调控区的功能水平比3．795提高1倍。

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