苯丙氨酸合成的关键酶基因aroG与pheA串联表达

摘要:

aroG和pheA是与苯丙氨酸合成有关的两个重要基因。在大肠杆菌(Escherichia coli)中，aroG基因编码脱氧阿拉伯糖型庚酮糖磷酸合酶(DS)，该酶催化由糖代谢中心途径分流出来的磷酸烯醇丙酮酸(PEP)和赤鲜糖4磷酸(E4P)缩合形成脱氧阿拉伯糖型庚酮糖磷酸(DAHP)的反应；pheA基因编码一个双功能酶蛋白，它同时催化两步关键反应，即具有分枝酸变位酶(CM)和预苯酸脱水(PD)的两种功能。采用PCR技术分别从两个不同品系的大肠杆菌染色体DNA中扩增到aroG和pheA。当这两个基因串联在一个质粒上导入大肠杆菌P2392中进行表达时，它们编码的酶DS、CM和PD活性分别提高43、44和22倍；导入短杆菌(Brevibacterium)2731中表达时，相应的酶活性分别提高123、23和56倍。两基因的串联表达能大幅度地提高工程菌株的苯丙氨酸发酵产量。

Abstract: