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微生物学报

  • 1996年第36卷第3期文章目次
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    • 逆转座子样元件Tca1用于白色念珠菌的分类鉴定

      1996, 36(3).

      摘要 (296) HTML (0) PDF 0.00 Byte (809) 评论 (0) 收藏

      摘要:已分离到一中等重复序列以及具有逆转座子样结构的元件Tcal(Transposon Candida albicans)。Tcal两端存在两个完全相同同向排列的序列LTR(Long Terminal Repeat)388bp,中间被一5.5kbDNA片段隔开。以alpha及Tcal为探针对40多种来自美国和中国的临床分离到的致病菌株进行杂交分析,根据杂交图谱,这些白色念株菌可被分成若干组,令人感兴趣的是来自同一地区菌种的遗传相关性比来自不同地区的大。比较URA3等基因的杂交结果,支持这种分析。尚未观察到alpha重复序列与其他酵母菌染色体DNA杂交的杂交条带,认为Tcal元件也许与C. albicans的遗传进化及其致病性有某种内在联系。

    • 棒杆菌质粒pXZ10145复制功能区定位

      1996, 36(3).

      摘要 (549) HTML (0) PDF 0.00 Byte (824) 评论 (0) 收藏

      摘要:将棒杆菌质粒pXZ10145或pNAT65的不同酶切片段装入大肠杆菌质粒pACYCl77中构建了pTSK系列重组质粒。转化棒状类细菌的实验结果确定了质粒pXZ10145上复制必需区的位置。质粒pXZ10145复制最小必需区定位在NaeI-NruI的1.2kb片段上,在这个片段上只有一个约940碱基的阅读框架。它编码一个质粒复制因子,以对位作用方式协助那些不能自我复制但复制起始区仍保持完整的pTSK质粒在棒状类细菌中复制。质粒pXZ10145复制起始区在一个NaeI-SalI的0.3kb片段上,位于已确定的复制因子编码框架中。

    • 全长δ-内毒素cryIA?基因在三种原核细胞中的表达

      1996, 36(3).

      摘要 (424) HTML (0) PDF 0.00 Byte (589) 评论 (0) 收藏

      摘要:采用随机引物法标记苏芸金芽孢杆菌δ-内毒素cryIA(b)基因:从苏芸金芽孢杆菌HD-73质粒基因文库中筛选到了分别包含δ-内毒素cryIA?基因5’端和3’端的6.5kb和4.3kb两个片段,然后分别缺失其非编码区,重连得到全长3.92kb的crylA?基因,用穿梭载体pHT3101亚克隆后分别转化大肠杆菌NM522、枯草杆菌AS1176及苏芸金芽孢杆菌晶体缺陷型4D10(H3ab),得到了具有同一质粒的三种工程菌。SDS-PAGE电泳表明此基因在三个宿主系统中均表达了分子量为133300的原毒素,分子量大小与苏芸金芽孢杆菌HD-73晶体蛋白完全相同,免疫检测表明表达蛋白和天然晶体蛋白具有相同的免疫原性。用提取的粗表达产物对二龄小菜蛾幼虫作杀虫试验,证明三种细胞产生的表达蛋白均具有杀虫活性,测得它们的LD_(50)分别为0.311μg/cm~2、0.024μg/cm~2和0.017μg/cm~2。

    • 黑曲霉糖化酶高产和低产菌株糖化酶基因调控区的克隆及其分析比较

      1996, 36(3).

      摘要 (644) HTML (0) PDF 0.00 Byte (1058) 评论 (0) 收藏

      摘要:以PCR合成的糖化酶高产菌株黑曲霉(Asp. Niger)T21糖化酶基因5’近端非编码区588bp(EcoRI-BamHI)的序列为探针,从T21染色体DNA中克隆到近2.0kb的糖化酶基因5’端非编码区序列,并以此序列为探针从糖化酶低产菌株黑曲霉3.795(T21的诱变出发株)的染色体DNA中克隆到1.5kb的糖化酶基因5’端非编码区序列。该二序列的分析测定结果表明,其结构特征与文献报道的黑曲霉糖化酶基因5’端非编码区的基本一致,被称为“核心启动子”(Core promoter)的TATAAAT框及GCAAT框,分别在翻译起始点的-109bp及-178bp处。此外,在曲霉amdS,amyB基因中已发现有调控功能的CCAAT序列存在于-449bp和-799bp处。高产和低产菌株糖化酶基因5’端非编码区序列的分析比较结果表明,有9个部位的碱基发生了变化。此实验结果为进一步研究黑曲霉糖化酶基因在转录水平上的调控规律打下了基础。

    • 产碱菌麦芽四糖淀粉酶水解淀粉的特性

      1996, 36(3).

      摘要 (628) HTML (0) PDF 0.00 Byte (762) 评论 (0) 收藏

      摘要:产碱菌麦芽四糖淀粉酶水解不同来源淀粉的产物组成有差异:G4占81.5%~98.8%,G_3占0%~9.6%,G_2占0%~5.9%。不同淀粉的水解速度在4170~9036mgGlch~-(1)·mg~(-1)之间。对可溶性淀粉的水解产物为6-型。麦芽四糖淀粉酶能被小麦、玉米及马铃薯的生淀粉吸附,其吸附率分别为60.2%、50.0%及52.2%,相对水解率分别为4.5%、2.7%及0%,水解生淀粉的主要产物为G_4。

    • 巨大芽孢杆菌BP931胞外青霉素G酰化酶的产生条件

      1996, 36(3).

      摘要 (666) HTML (0) PDF 0.00 Byte (826) 评论 (0) 收藏

      摘要:研究了巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP 931胞外青霉素G酰化酶的产生条件。菌在由葡萄糖0.7%,氮源1号0.5%,酵母膏1.0%和苯乙酸0.8%组成的液体培养基(灭菌前pH9.0,灭菌后pH8.0)中,28℃振荡培养44h。以6-硝基-3-苯乙酰胺基苯甲酸为底物,培养滤液酶活力为9.0IU/ml。诱导物苯乙酸于培养6h后加入,酶活力可以提高到11.0IU/ml。Ca2+、Al3+、Sn3+、Mn2+和Fe2+离子降低酶的形成;Cu+和C02+离子显著抑制菌生长,降低酶的形成;Zn2+,Cd2+和Hg2+离子完全抑制菌生长和酶形成。

    • 地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA变位酶和消旋酶的纯化及性质

      1996, 36(3).

      摘要 (590) HTML (0) PDF 0.00 Byte (997) 评论 (0) 收藏

      摘要:采用原生质体裂解方法确定甲基丙二酰CoA变位酶(MCM)和消旋酶(MCR)均是胞浆内酶。各经过四步纯化得到电泳纯酶。纯化MCM酶的比活力为12.84u/mg,纯化倍数为528,酶活回收为60%,纯化的MCM酶服从典型的米氏底物饱和曲线,对琥珀酰CoA和辅酶B_(12)的K_m值分别为9.723#mol/L和0.1277#mol/L。经SephadexG-150测定MCM分子量约为134.000±2000,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示两条分子量分别为67000和65000的蛋白带,说明该酶由两个大小不等亚基组成。吸收光谱测定每摩尔纯化全酶含两摩尔辅酶B_(12)。纯化MCR酶比活力为2.305u/mg,纯化倍数96,酶活回收46.7%。MCR酶由两个分子量均为17500的亚基组成。MCR酶活性能被二价金属离子Cu2+、Co2+、Mg2+、Mn2+和Fe2+所促进。两酶的酶学性质和其他生物来源的MCM、MCR酶明显相似。

    • 镰孢体外抗原的电泳及免疫印渍分析

      1996, 36(3).

      摘要 (437) HTML (0) PDF 0.00 Byte (454) 评论 (0) 收藏

      摘要:用SDS-PAGE及免疫印渍法分析了三种镰孢的体外抗原(exoantigen)和菌丝体可溶性蛋白质的部分特性,并研究了培养基对体外蛋白质含量的影响。结果表明,在电泳分析中,三种镰孢体外抗原及菌丝体可溶性蛋白质均具有各自菌种的特征,可作为菌种分类鉴定的重要指标。免疫印渍分析显示,体外抗原更适于用作免疫分类鉴定的指标,因为用体外抗原免疫动物所产生的抗体的特异性比菌丝体可溶性蛋白质要好。三种镰孢的体外抗原的抗体与种间菌株均有程度不等的交叉反应,但却不与谷物发生任何交叉反应,可用于谷物中镰孢的快速检测。在镰孢体外抗原中,能刺激机体产生抗体的抗原分子量在28000以上。葡萄糖酵母膏培养基比蔗糖硫酸铵培养基更适于体外抗原的产生。

    • 用CHEF凝胶电泳探测远缘担子菌间原生质体融合后的染色体变异

      1996, 36(3).

      摘要 (545) HTML (0) PDF 0.00 Byte (780) 评论 (0) 收藏

      摘要:用电场诱导灰盖鬼伞(Coprinus cinereus Co5104,his~-)和佛罗里达侧耳(Pleurotusflorida Pf67, ade~-)两菌株的原生质体融合,获得了两类属间融合子:一类为不断发生分离的单核体,另一类为稳定的双核异核体。利用等高钳位均匀电场(CHEF)凝胶电泳技术比较融合子与两亲本的染色体长度多型性(CLP),显示出融合子的染色体变异以整条染色体的丢失为主。结合形态观察和DAPI核荧光染色的结果,推测单核融合子在胞质融合后很可能发生了核融合,但来自亲本Pf67的染色体不断丢失,最后融合子的遗传组成以来自Co5104的染色体为主;而双核融合子在质配之后可能并未发生核配,不过,来自各亲本的染色体最终均只有部分得以保留在融合子中。

    • 云南土壤放线菌生态分布的研究

      1996, 36(3).

      摘要 (784) HTML (0) PDF 0.00 Byte (670) 评论 (0) 收藏

      摘要:云南具有极为复杂的地理气候。根据云南省不同的地质、地理、土壤、气候、植被特点选择样区,采集土壤样品,研究了云南不同地区、不同生态环境放线菌的生态分布与植被的关系。将云南土壤放线菌区系划分为热带区系、亚热带高原区系、滇西北高山区系和雪山区系四种类型。对云南土壤放线菌区系的特点进行了讨论。

    • 花生根瘤菌在根瘤菌系统分类中的地位研究

      1996, 36(3).

      摘要 (517) HTML (0) PDF 0.00 Byte (1037) 评论 (0) 收藏

      摘要:用12株分类地位已知的代表菌为对照,采用现代细菌分类学方法,对从四川省4个花生产区的天府3号和地方品种上分离的花生根瘤菌,从系统发育方面,探索了花生根瘤菌在根瘤菌系统中的分类地位。多聚酶链反应(PCR)扩增的16S rRNA的4种限制性内切酶长度多态(PCR-RFLP)以及16S rRNA部分碱基序列测定结果同时表明:四川花生根瘤菌与慢生大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)相似性极高。由此推论它们在系统发育及进化方向上是基本一致的。该结果为研究花生根瘤菌的确切分类地位打下了基础。

    • 恶性疟原虫74肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌的表达和家兔免疫应答

      1996, 36(3).

      摘要 (547) HTML (0) PDF 0.00 Byte (755) 评论 (0) 收藏

      摘要:利用减毒鼠伤寒沙门氏菌来表达外源抗原并制备口服活菌苗,是疫苗研究的一个新的突破。作者已在减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261以β—半乳糖苷酶(GZ)融合蛋白的形式表达了人工合成的恶性疟原虫74肽基因HGFC。现报道用活菌SL3261(pWRC)(C组)、SL3261(pWR450-1)(R组)分别免疫新西兰家兔,研究其在家兔体内免疫应答的结果。

    • 从1995年国家自然科学基金申请与资助情况浅析我国微生物学科研究现状

      1996, 36(3).

      摘要 (434) HTML (0) PDF 0.00 Byte (813) 评论 (0) 收藏

      摘要:国家自然科学基金制实施十多年来,得到众多科学家的大力帮助和支持,受到科技人员的广泛重视和信赖。以微生物学科为例,近两年参与基金申请的单位所在地覆盖了大陆除西藏外的所有省市,且申

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