摘要:以猪瘟病毒疫苗Ｔｈｉｖｅｒｖａｌ株（Ｔ株）为实验材料，研究该病毒株在ＰＫ１５细胞中增殖的基本特性与规律。在ＰＫ１５细胞中，猪瘟病毒Ｔ株在感染后１２ｈ即可检测到子代病毒粒子。接毒后４８ｈ，几乎所有的细胞都被病毒感染；到６０ｈ，释放到培养液中有活性的病毒粒子达到最高峰，为１０７ＴＣＩＤ５０／ｍＬ。培养液中的病毒粒子在３７℃半寿期只有３个小时。同时，建立了ＭＰＫ细胞ＣＳＦＶＴ株的感染模式，其ＣＳＦＶ的滴度可达１０８ＴＣＩＤ５０／ｍＬ。在此基础上，用抗ＣＳＦＶ包膜蛋白Ｅ２和非结构蛋白ｐ１２０的单克隆抗体显示了病毒在细胞中增殖的部位，进而应用电镜技术观察到成熟的病毒粒子及可能处在不同发育阶段的子代病毒粒子

摘要:将欧芹（Ｐｅｔｒｏｓｅｌｉｎｕｍｃｒｉｓｐｕｍ）苯丙氨酸脱氨酶（ＰＡＬ）ｃＤＮＡ亚克隆到组成型表达载体ｐＭＧ３６ｅ启动子Ｐ３２下游，电穿孔法转化乳酸乳球菌，获得有ＰＡＬ表达活性的乳酸乳球菌工程菌（ｐＭＧ３６ｅＰＡＬ／Ｌ．ｌａｃｔｉｓＭＧ１３６３）。通过递归ＰＣＲ合成了一段１２０ｂｐ的调控片段，用以将ｐＭＧ３６ｅ改造为分泌型表达载体ｐＸＨＳ，以翻译偶联的方式表达ＰＡＬ，可使ＰＡＬ的Ｎ末端带上ｕｓｐ４５信号肽，结果亦检测到ＰＡＬ酶活性。自行分离克隆了乳酸乳球菌热休克蛋白基因ｄｎａＪ的启动子区域，构建了热诱导表达载体ｐＸＨＪ，获得ＰＡＬ热诱导表达工程菌（ｐＸＨＪＰＡＬ／Ｌ．ｌａｃｔｉｓＩＬ１４０３），经３０℃至３７℃热诱导，可使ＰＡＬ表达活性提高至２倍。本文还就乳酸乳球菌ＰＡＬ工程菌在经典型苯丙酮尿症防治中的应用进行了分析和讨论

摘要:为了研究ＥＢ病毒潜伏膜蛋白１（ＬＭＰ１）基因对上皮细胞增殖的影响，探索ＬＭＰ１在上皮细胞肿瘤发生中所起的作用。用ＬＭＰ１基因真核表达质粒转染人胚肾上皮细胞，检测了转染细胞中ＬＭＰ１的表达，观察细胞在软琼脂中的集落形成能力、ＭＴＴ吸收能力以及ＰＣＮＡ的表达情况。结果显示，被ＬＭＰ１基因转染的细胞生长旺盛，能在软琼脂中形成多个集落，ＭＴＴ吸收能力增强，ＰＣＮＡ的表达水平增高。因此认为ＬＭＰ１基因能明显改变上皮细胞的生物学行为，促进细胞的生长、增殖和转化，使转染的上皮细胞获得肿瘤细胞的生长特征

摘要:鉴定了Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１和ＪＭ１１０的部分遗传标记，作为受体菌分别用于ＢｓｔＮＩ同功酶限制－修饰系统中限制性内切酶（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ，简称Ｒ）基因和甲基化酶（Ｍｅｔｈｙｌａｓｅ，简称Ｍ）基因表达的检测。用外切酶ＩＩ单向删切含ＲＭ基因的ＤＮＡ片段，获得２３个缺失突变亚克隆。通过检测各亚克隆表达的Ｒ酶和Ｍ酶活性，将Ｒ和Ｍ基因分别定位在距克隆位点ＰｓｔＩ的０２→１４ｋｂ和１５→３．３ｋｂ范围内。分析表明：该系统属于Ｉ类限制修饰系统，两个基因受控于不同的启动子；该系统与Ｅ．Ｃｏｌｉ染色体编码的胞嘧啶ＤＮＡ甲基转移酶（Ｄｃｍ）的识别序列相同，后者的甲基化作用也能阻止Ｒ酶的切割。Ｒ＋Ｍ－的重组质粒对Ｄｃｍ＋和Ｄｃｍ－的宿主都是致死性的，这说明在进化过程中，与Ｒ基因紧密连锁的Ｍ基因对系统的存在至关重要

摘要:采用ＲＴＰＣＲ技术扩增大鼠ＯＢｃＤＮＡ编码区序列。ＰＣＲ产物酶切后定向克隆至ｐＵＣ１９质粒。经核苷酸序列测定表明与文献报道的大鼠ＯＢｃＤＮＡ编码区序列一致。继之构建了ｐＢＶ２２０ｒＯＢ表达质粒并获得了ＯＢ基因在大肠杆菌中的特异表达。大鼠ＯＢ基因产物的获得为研究肥胖与某些非传染性疾病（如糖尿病、高血压病）间的关系提供了条件

摘要:用四种培养基培养产生紫膜极端嗜盐菌盐生盐杆菌（Ｈａｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｈａｌｏｂｉｕｍ）菌株Ｒ１，通过超速离心和蔗糖密度梯度纯化紫膜，ＳＤＳ－ＰＧＡＥ后用考马斯亮蓝染色的结果显示其合成的紫膜蛋白的形式有所差异。从蛋白胨培养基上获得的紫膜有三条蛋白带，分子量约２６～２７５ｋＤ，而从复合培养基、合成培养基和人工海水培养基上获得的紫膜，仅呈现一条蛋白带，分子量约２６ｋＤ，即蛋白胨培养基上的成熟紫膜蛋白形式。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｉｎｇ的结果证明，在以上四种培养基上获得的纯化紫膜经ＳＤＳ－ＰＧＡＥ后考马斯亮蓝染色的条带确系紫膜蛋白，但还存在含量低于考马斯亮蓝染色灵敏度的紫膜蛋白带，从复合培养基、合成培养基和人工海水培养基所得紫膜在２８ｋＤ左右有一条浅带，但从蛋白胨培养基所得紫膜无此带；四种培养基所得紫膜在２３５ｋＤ左右都有一条浅带。可见，培养基营养成分的差别影响了紫膜蛋白的存在形式

摘要:测定了从我国１８个省、市、自治区分离到的２０４个禽病原性大肠杆菌优势血清型分离株的外膜蛋白型（ＯｕｔｅｒＭｅｍｂｒａｎｅＰｒｏｔｅｉｎＰａｔｅｒｎｓ，ＯＭＰ型）。这些分离株共产生了４个ＯＭＰ型，５６个Ｏ１８分离株可分为３个ＯＭＰ型，５４个Ｏ７８分离株、２８个Ｏ２分离株、２６个Ｏ８８分离株、２２个Ｏ１１分离株和１８个Ｏ２６分离株，分别出现了４、２、１、３和１个ＯＭＰ型。其中，ＯＭＰ１型为６个血清型所共有，ＯＭＰ３型则同时存在于Ｏ１８、Ｏ７８、Ｏ２和Ｏ１１分离株中。结果表明，优势血清型中，Ｏ１８、Ｏ７８、Ｏ２和Ｏ１１分离株具有多样性的ＯＭＰ型，而Ｏ８８、Ｏ２６分离株的ＯＭＰ型则高度一致，所测６个优势血清型的分离株间存在共同的ＯＭＰ型

摘要:将天花粉蛋白、烟草几丁质酶和烟草β１，３葡聚糖酶的结构基因分别克隆到原核表达系统中进行表达，对三种基因的原核表达产物的粗提取物分别进行体外抗菌活性检测，发现三种蛋白质均有抗真菌活性。三种蛋白中任意两种蛋白的组合，其抗真菌活性显著高于单一组分的抗真菌活性。三种蛋白共同作用时，获得了更好的抗真菌效果

摘要:以ＤｉｇｄＵＴＰ标记的１６ＳｒＲＮＡ及２３ＳｒＲＮＡ基因为探针，分析了八个血清群５４个血清型６４株国内外致病性钩端螺旋体参考株和２７株野生株染色体经限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ消化后的ｒＲＮＡ基因限制性图谱。结果发现，９１株菌中共有５６个核糖核酸型（Ｒｉｂｏｔｙｐｅ，简称ＲＴ），除部分血清群中少数不同的血清型有相同的ＲＴ型外，大部分血清型都有独特的ＲＴ型，同一血清群往往拥有共同的核心片段；除黄疸出血群的黄疸出血型外，同一血清型的国内和国际参考株的ＲＴ型不相同；大多数野生株的ＲＴ和相应血清型国内参考株相同，差异也只表现为谱形上个别带型的缺少和增加，所研究的波摩那型野生株的ＲＴ型和国际参考株相同而和国内参考株不同

摘要:在摇瓶条件下，对真养产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）的３羟基丁酸与３羟基戊酸共聚物（ＰＨＢＶ）发酵过程中ＨＶ组分的前体物质———丙酸的加入时间和加入量进行了研究，结果表明，ＰＨＢＶ中ＨＶ组分含量与丙酸的加入时间和加入量有密切的关系，丙酸的最佳加入时间为菌体生长阶段结束后的多聚物合成初期；尽管高浓度丙酸下可获得较高的ＨＶ组分含量，但会明显抑制菌体的生长和产物的合成。通过对２Ｌ小罐中ＰＨＢＶ合成阶段流加不同糖／酸比混合液所得的发酵结果的比较，并在综合考虑ＰＨＢＶ浓度、ＨＶ组分含量、生产强度和生产成本等基础上，提出了在ＰＨＢＶ合成期流加液的糖／酸比应随菌体对丙酸利用能力的下降而不断增加的流加策略，在此条件下，细胞干重、ＰＨＢＶ浓度和ＰＨＢＶ含量和ＨＶ摩尔分率分别达到５２１ｇ／Ｌ、４０８ｇ／Ｌ、７８３％和１６２ｍｏｌ％，ＨＶ组分对丙酸的产率系数为０５ｇ／ｇ，ＰＨＢＶ的生产强度达到０７４ｇ／（Ｌ／ｈ）。

摘要:分离的酒色着色菌（Ｃｈｒｏｍａｔｉｕｍｖｉｎｏｓｕｍ）内膜系统在光照和Ｏ乙酰丝氨酸（ＯＡＳ）存在的条件下，能以３５９纳摩尔／毫克细菌叶绿素·小时（ｎｍｏｌ·ｍｇＢｃｈｌ－１·ｈ－１）的速度催化ＳｅＯ２－３合成硒半胱氨酸。用超声波处理的内膜系统，催化速度仅为处理前的１１％，加入谷胱甘肽（ＧＳＨ）和还原型辅型Ⅱ（ＮＡＤＰＨ）后，其速度增加至处理前的８８３％，该反应对光具有依赖性，进一步实验表明，纯化的谷胱甘肽还原酶，在有半胱氨合酶、ＯＡＳ和ＮＡＤＰＨ共存时，能催化ＳｅＯ２－３转化为硒半胱氨酸，表明ＳｅＯ２－３在内膜系统中能被光偶联的谷胱甘肽还原酶还原为Ｓｅ２－，然后经半胱氨酸合酶的催化作用转化为硒半胱氨酸

摘要:从不同来源的细菌菌株筛选获得一株吸附还原Ａｕ３＋较强的菌株Ｄ０１，经鉴定为巨大芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｍ）Ｄ０１。菌株Ｄ０１在Ａｕ^３＋浓度６００ｍｇ／Ｌ下仍能较好生长。从电化学反应表明，该菌具有较强的还原力，它能将金催化剂的前驱体Ａｕ^３＋／αＦｅ２Ｏ３还原成具有催化ＣＯ＋Ｏ２→ＣＯ２的高分散度的Ａｕ０／αＦｅ２Ｏ３催化剂

摘要:从１０００份土壤和水等样品中，经富集培养、血平板分离、摇瓶培养和排油活性测定等方法筛选出１０株能产生各种生物表面活性剂的菌株（包括细菌，酵母和霉菌）。其中一株细菌产海藻糖脂，一株细菌产鼠李糖脂，两株细菌分别产长碳链不饱和脂肪酸和壬二酸，两株酵母产生的脂多糖具有良好的乳化性能

摘要:分类号Ｑ７８１文献标识码Ａ文章编号０００１６２０９（１９９９）０３０２６８７１丙型肝炎是常见的传染病之一，易于慢性化及发展为肝硬化，且与肝癌的发生关系密切，目前尚无理想的防治手段。国内外对丙型肝炎疫苗的研究仍处于克隆表达ＨＣＶ部分基因产物或合成…

摘要:分类号Ｑ５１７文献标识码Ｂ文章编号０００１６２０９（１９９９）０３０２７２７４Ｌ苯丙氨酸（ＬＰｈｅ）是一种重要的氨基酸，用于氨基酸输液和二肽甜味剂的生产。近十年来有关ＬＰｈｅ生产的研究非常活跃，其中之一是利用转氨酶由苯丙酮酸（ＰＰＡ）生产…

摘要:分类号Ｑ９３９．９，Ｒ３９２．７文献标识码Ａ文章编号０００１６２０９（１９９９）０３０２７５７８本实验室曾对气味沙雷氏菌（Ｓｅｒａｔｉａｏｄｏｒｉｆｅｒａ）抗肿瘤活性及作用机理进行了深入的研究，发现该菌苗具有抑制体内肿瘤细胞增殖的作用［１］，并…

摘要:分类号ＴＱ９２０．１文献标识码Ｂ文章编号０００１６２０９（１９９９）０３０２７９８１十三碳二元酸（ＤＣ１３）是化学合成麝香Ｔ香料和尼龙１３１３工程塑料的重要原料。ＤＣ１３在自然界中不单独存在，用化学方法难以合成，只能从菜籽油中提出甘油芥酸酯再经…

摘要:分类号Ｑ９３３文献标识码Ｃ文章编号０００１６２０９（１９９９）０３０２８２８５１９８８年，ＪｏｈｎＣａｉｒｎｓ在Ｎａｔｕｒｅ杂志上发表了一题为“ＴｈｅＯｒｉｇｉｎｏｆＭｕｔａｔｉｏｎｓ”［１］论文，宣称细菌在某种非致死的选择条件下有选择有利突变…